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主题:【讨论】霉菌污染培养箱,肿么办

浏览 |回复14 电梯直达
wangjstw
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我们的病毒实验室是一种简单的负压实验室,负压非常有限,但密封性相对要好得多。这房子一密封,温湿度就恒定得多了,于是出现了一个问题,霉菌开始悄悄滋生了。看看我们的培养结果,是不是帅呆了?

请有霉菌处理经验的老司机们支支招了。
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2018/5/21 19:17:37 Last edit by wangjstw 举报
wccd1
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1. 培养箱消毒:先用纯水擦洗,再用95的酒精擦洗,再照紫外就可以拉!注意周围环境的清洁就不会那么容易污染的拉!

2. 根据自己的经验是在补充水时最好把水加热一下,达到培养箱的温度。

3. 这么早就养细胞了,我们这里一般是用70%的乙醇擦洗,然后再用0.1%的新洁尔灭擦洗,不放心的话再用高锰酸钾加甲醛1:1比例熏一遍。注意要是熏的话千万注意混合之后马上离开,然后密闭细胞培养室,味道很刺激的。最好在养细胞前消毒,否则,确实没地方放细胞。

4. 我们的方法比较简单,先用擦拭内壁,通风10分钟,紫外线照射30分钟即可。

5. 我们的通常处理是先用75%的酒精擦拭内壁,然后用甲醛+高锰酸钾熏蒸一个晚上,然后通风一整天(同时打开紫外线照射)。

6. 我们是把培养箱里的板层拿出来高压一下,箱壁用75%酒精擦一遍,换用诗乐氏擦一遍,再紫外照一夜,效果很好,其他的请高手指教。

7. 熏蒸后吹一天是绝对不够的,最起码要一个星期才可以让甲醛散尽,要不细胞长不好的

8. 有的培养箱能加热内壁到90度,也有的带有紫外线功能。常规应该每周用酒精擦洗内部一次。具体的操作请参考培养箱的手册,或着咨询培养箱技术支持。使用消毒剂应小心,培养箱内有检测温度、湿度和二氧化碳浓度的传感器,腐蚀性消毒剂或有机溶剂有可能损坏某些器件,请慎用。另外,挥发性的甲醛有毒,易燃、易爆。如果在培养箱内残留甲醛的话,细胞会死光光哦(我实验室的真实故事)。总之,先看培养箱手册,再联系技术支持,方可万无一失啊。

9. 常规最好什么也不放!硫酸铜的作用是抑制细菌生长(但多数用在处理污染的孔板)。因为现在的孵箱都有抑菌功能。

10. 我们实验室的做法:把平皿高压灭菌后,在无菌操作台内加入适量的灭菌双蒸水或者生理盐水.再加少量新洁尔灭,浓度没关系.细胞养的都可以.
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2018/5/21 21:55:26 Last edit by wccd1
wangjstw
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1. 培养箱消毒:先用纯水擦洗,再用95的酒精擦洗,再照紫外就可以拉!注意周围环境的清洁就不会那么容易污染的拉!
……
10. 我们实验室的做法:把平皿高压灭菌后,在无菌操作台内加入适量的灭菌双蒸水或者生理盐水.再加少量新洁尔灭,浓度没关系.细胞养的都可以.


无巧不成书,下午找到的也正是这一篇,我给顺手拿下来做成了文档。这种汇集,共同点是有不少,但也有不少前矛后盾的地方。
要能找到硬帮帮的文献就好了。
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2018/5/22 14:53:32 Last edit by wangjstw
fengdaox
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杀孢子剂,各类消毒剂轮换
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1. 培养箱消毒:先用纯水擦洗,再用95的酒精擦洗,再照紫外就可以拉!注意周围环境的清洁就不会那么容易污染的拉!

2. 根据自己的经验是在补充水时最好把水加热一下,达到培养箱的温度。

3. 这么早就养细胞了,我们这里一般是用70%的乙醇擦洗,然后再用0.1%的新洁尔灭擦洗,不放心的话再用高锰酸钾加甲醛1:1比例熏一遍。注意要是熏的话千万注意混合之后马上离开,然后密闭细胞培养室,味道很刺激的。最好在养细胞前消毒,否则,确实没地方放细胞。

4. 我们的方法比较简单,先用擦拭内壁,通风10分钟,紫外线照射30分钟即可。

5. 我们的通常处理是先用75%的酒精擦拭内壁,然后用甲醛+高锰酸钾熏蒸一个晚上,然后通风一整天(同时打开紫外线照射)。

6. 我们是把培养箱里的板层拿出来高压一下,箱壁用75%酒精擦一遍,换用诗乐氏擦一遍,再紫外照一夜,效果很好,其他的请高手指教。

7. 熏蒸后吹一天是绝对不够的,最起码要一个星期才可以让甲醛散尽,要不细胞长不好的

8. 有的培养箱能加热内壁到90度,也有的带有紫外线功能。常规应该每周用酒精擦洗内部一次。具体的操作请参考培养箱的手册,或着咨询培养箱技术支持。使用消毒剂应小心,培养箱内有检测温度、湿度和二氧化碳浓度的传感器,腐蚀性消毒剂或有机溶剂有可能损坏某些器件,请慎用。另外,挥发性的甲醛有毒,易燃、易爆。如果在培养箱内残留甲醛的话,细胞会死光光哦(我实验室的真实故事)。总之,先看培养箱手册,再联系技术支持,方可万无一失啊。

9. 常规最好什么也不放!硫酸铜的作用是抑制细菌生长(但多数用在处理污染的孔板)。因为现在的孵箱都有抑菌功能。

10. 我们实验室的做法:把平皿高压灭菌后,在无菌操作台内加入适量的灭菌双蒸水或者生理盐水.再加少量新洁尔灭,浓度没关系.细胞养的都可以.
这么多方法,应该有用的上的
qianguiyun1
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消毒以后还要将消毒剂清理干净,否则细胞不容易培养
wangjstw
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这么多方法,应该有用的上的


虽说方法不少,但自相矛盾者也不少,综合起来看真不排除道听途说、不辨真假之虞。
实验室工作是最基础的科学操作。而在科学的道路上,我们太缺少细节的养成了。
yy_0324
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虽说方法不少,但自相矛盾者也不少,综合起来看真不排除道听途说、不辨真假之虞。
实验室工作是最基础的科学操作。而在科学的道路上,我们太缺少细节的养成了。
那就只能自己去辨别了
wangjstw
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那就只能自己去辨别了


以本版版主的身份说出这样的话,着实让人吃惊。
作为较为著名的检验论坛,版主的话多多少少可以代表行业乃至国家的技术水平和态度的。
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2018/5/28 8:38:55 Last edit by wangjstw
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最关键的就是必须做到无菌操作,不留后患,否则就自认倒“霉”。